Spatiotemporally differential expression of HER (human epithelial growth factor receptor)-2 with sexual dimorphism in submandibular gland of mice

SUMMARY: Considering that the submandibular gland (SMG) of postnatal mice performs active cell proliferation, apoptosis and differentiation which are regulated by proto-oncogene products in cancerous cells, the expression and localization of a proto-oncogene product HER (human epidermal growth factor receptor)-2 was examined in SMG of postnatal mice. In Western blot analysis, the expression for HER-2 was high until pre-puberty, and it decreased from puberty to young adult stages with male SMG more dominant. In immunohistochemistry, the immunoreactivity was positive in acinar and ductal cells of newborn SMG with distinct localization at the intercellular apposition sites. The immunoreactivity in acinar cells progressively decreased to negligible levels by pre-pubertal stage, while it remained positive in most ductal cells throughout the postnatal time-course. The immunoreactivity in cells of terminal tubules and intercalated ducts, both of which have a high potential to produce cells, were seen at levels similar to those of more proximal ducts, while the immunoreactivity in ductal basal cells was significantly high, but the granular convoluted tubule cells were seen at negligible levels in male and at faint levels in female. In immuno-electron microscopy of excretory ducts, the immunoreactivity was dominantly localized on the basal infolding membranes as well as vesicles and vacuoles of various sizes, but rarely in Golgi apparatus and mitochondria. The immunoreactivity without association to any membranous structures were also seen, though not numerous. The relation of expression levels of HER-2 in various portions of normal SMG to those in their cancerous ones is briefly discussed.

RESUMEN: Considerando que la glándula submandibular (GSM) de ratones postnatales realiza la proliferación celular activa, apoptosis y diferenciación que están reguladas por productos protooncogénicos en células cancerosas, la expresión y localización de un producto protooncogénico HER (receptor del factor de crecimiento epidérmico humano) - 2 se examinó en GSM de estos ratones. En el análisis de Western blot, la expresión de HER-2 fue alta hasta la prepubertad, y disminuyó desde la pubertad hasta las etapas de adultos jóvenes con GSM macho más dominante. En inmunohistoquímica, la inmunorreactividad fue positiva en las células acinares y ductales de GSM de recién nacido con una localización distinta en los sitios de aposición intercelular. La inmunorreactividad en las células acinares disminuyó progresivamente a niveles insignificantes en la etapa prepuberal, mientras que permaneció positiva en la mayoría de las células ductales durante el transcurso del tiempo posnatal. La inmunorreactividad en las células de los túbulos terminales y los conductos intercalados, los cuales tienen un alto potencial para producir células, se obser- vó a niveles similares a los de los conductos más proximales, mientras que la inmunorreactividad en las células basales ductales fue significativamente alta, pero en el túbulo contorneado granular las células se observaron en niveles insignificantes en los machos y en niveles débiles en las hembras. En la microscopía inmunoelectrónica de los conductos excretores, la inmunorreactividad se localizó de manera predominante en las membranas de pliegues basales, así como en vesículas y vacuolas de varios tamaños, pero raramente en el aparato de Golgi y en las mitocondrias. También se observó la inmunorreactividad sin asociación a ninguna estructura membranosa, aunque no numerosa. Se discute brevemente la relación de los niveles de expresión de HER-2 en varias porciones de GSM normal con aquellos en sus cancerosos.

Chronic Stress Induces Neurotrophin-3 in Rat Submandibular Gland

PURPOSE: Plasma neurotrophin-3 (NT-3) levels are associated with several neural disorders. We previously reported that neurotrophins were released from salivary glands following acute immobilization stress. While the salivary glands were the source of plasma neurotrophins in that situation, the association between the expression of neurotrophins and the salivary gland under chronic stress conditions is not well understood. In the present study, we investigated whether NT-3 levels in the salivary gland and plasma were influenced by chronic stress. MATERIALS AND METHODS: Expressions of NT-3 mRNA and protein were characterized, using real-time polymerase chain reactions, enzyme-linked immunosorbent assay, and immunohistochemistry, in the submandibular glands of male rats exposed to chronic stress (12 h daily for 22 days). RESULTS: Plasma NT-3 levels were significantly increased by chronic stress (p<0.05), and remained elevated in bilaterally sialoadenectomized rats under the same condition. Since chronic stress increases plasma NT-3 levels in the sialoadenectomized rat model, plasma NT-3 levels were not exclusively dependent on salivary glands. CONCLUSION: While the salivary gland was identified in our previous study as the source of plasma neurotrophins during acute stress, the exposure to long-term stress likely affects a variety of organs capable of releasing NT-3 into the bloodstream. In addition, the elevation of plasma NT-3 levels may play important roles in homeostasis under stress conditions.

Delay in maturation of the submandibular gland in Chagas disease correlates with lower DNA synthesis

It has been demonstrated that the acute phase of Trypanosoma cruzi infection promotes several changes in the oral glands. The present study examined whether T. cruzi modulates the expression of host cell apoptotic or mitotic pathway genes. Rats were infected with T. cruzi then sacrificed after 18, 32, 64 or 97 days, after which the submandibular glands were analyzed by immunohistochemistry. Immunohistochemical analyses using an anti-bromodeoxyuridine antibody showed that, during acute T. cruzi infection, DNA synthesizing cells in rat submandibular glands were lower than in non-infected animals (p < 0.05). However, after 64 days of infection (chronic phase), the number of immunolabeled cells are similar in both groups. However, immunohistochemical analysis of Fas and Bcl-2 expression did not find any difference between infected and non-infected animals in both the acute and chronic stages. These findings suggest that the delay in ductal maturation observed at the acute phase of Chagas disease is correlated with lower expression of DNA synthesis genes, but not apoptotic genes.

Estudo estereológico dos diferentes componentes estruturais de glândulas submandibulares de ratos machos e fêmeas / Stereological study of the various morphologic structures of male and female rat submandibular glands

Na presente pesquisa, avaliou-se as dimensöes morfométricas de ácinos, ductos intercalares, ductos excretores e estroma de glândulas submandibulares de ratos de ambos os sexos. A análise dos resultados mostrou que: a) a massa glandular dos machos foi 42 por cento maior do que nas fêmeas; b) os ácinos exibiram densidade de volume, densidade de superfície e relaçäo superfície-volume maiores nas fêmeas e volume nuclear e volume total do compartimento maiores nos machos; c) as densidades de volume e superfície do compartimento dos ductos intercalares foram maiores nas fêmeas e o seu volume nuclear foi maior nos machos; d) a densidade de superfície dos ductos excretores foi maior nos animais fêmeas; e) o volume total do estroma foi significativamente maior nos machos; f) o número absoluto de células do estroma foi maior nos animais machos, e nos demais compartimentos näo se observou diferenças estatisticamente significantes; g) o número de ácinos foi semelhante nos machos e fêmeas. Os resultados obtidos indicaram que as glândulas submandibulares dos ratos machos exibem diferenças detectáveis pela morfometria, nos compartimentos dos ácinos, ductos intercalares, ductos excretores e estroma em relaçäo às fêmeas

The maturation of convoluted granular tubule cells from mouse submandibular glands during its postnatal development: increase in the cell size

We studied the evolution of nuclear and cytoplasmic volume and of the cytoplasm-nucleus ratio of convoluted granular tubule secretory cells in the submandibular glands of male albino Swiss mice at 21, 28, 35, 42 and 56 days of age. Nuclear volume was measured on 0.25um sections by morphometric method of Bach and the volume densities of nucleus and cytoplasm were determined by point-count volmetry. The date were used to calculate the cytoplasm/nucleus ratio and cytoplasmic volume. The nuclear volume of convoluted tubule cells decreased by 44.6% over the study period, where as the cytoplasmic volume increased markedly by 126.2% from 21 to 35 days of postnatal life, with no statiscally significant increases occurring thereafter. The cytoplasm/nucleus ratio increased by 331.3% over the study period

Efeitos da radiaçäo eletromagnética na glândula submandibular de fetos de rato / Effects of radiofrequency radiation on submandibular gland of rat foetus

A radiaçäo eletromagnética (REM) na faixa de rádio-frequência (rf) que ocupa de 300 KHz a 300 MHz é utilizada atualmente para inúmeros fins industriais, médicos e científicos. A REM ao interagir com materiais biológicos pode ser transmitida, absorvida e refletida em vários graus, podendo resultar tanto em efeitos benéficos medicinais quanto em danos biológicos. Esse trabalho teve o objetivo de estudar morfometricamente os possíveis efeitos da radiofrequência e de gradientes de campos magnéticos em glândulas submandibulares de fetos de ratos. Para tal, foram irradiadas fêmeas com rf de 20 MHz, 7,4 mW de potência e SAR=30 mW/kg (Specific Absortion Rate), durante 10 minutos diários, até o 20§ dia de gestaçäo, após o qual foram sacrificadas. Seus fetos foram retirados e processados para análise em microscópio de luz. Foram feitas avaliaçöes morfométricas da densidade de volume, volume absoluto e relaçäo núcleo-citoplasma das células de túbulos terminais, vasos sanguíneos e tecido conjuntivo da glândula submandibular. A comparaçäo dos resultados pela análise de variância demonstrou ocorrer um significativo aumento da densidade de volume e volume absoluto nuclear e citoplasmático das células dos túbulos terminais do grupo irradiado em relaçäo ao controle. Em relaçäo as células de ductos näo houve diferença estatística significante. A densidade de volume de tecido conjuntivo foi maior no controle. Em base a esses dados é possível pressupor que radiaçöes eletromagnéticas mesmo as de baixa intensidade podem promover alteraçöes volumétricas de células dos túbulos terminais

Influence of oestrous cyclicity on some aspects of carbohydrate metabolism of the submandibular salivary gland of the albino rat.

Titres of oestrogen are known to rise from dioestrous to proestrous stage of the oestrous cycle. Such a rising level of estrogen may be responsible for rise in intracellular concentration of cAMP. The estrogen primed tissue, changing from proestrous to oestrous, under known increasing progesterone level and preovulatory LH surge, may led to a sort of balancing action on the varying levels of glycogen synthetase and phosphorylase enzyme activities so as to play a role in maintaining a steady state of glycogen concentration in the salivary gland. Therefore, alterations in glycogen concentration and the activities of concerned enzymes viz. glycogen synthetase, phosphorylase and cAMP-specific phosphodiesterase (cAMP-PDE) have been studied in albino rats. An abrupt but significant drop in cAMP-specific phosphodiesterase (cAMP-PDE) activity was found to facilitate corresponding reduction in glycogen and lowering protein concentration of the gland, during transition from oestrous to metoestrous. Main features of the meteostrous stage were depletion of glycogen and protein concentration. Taking into consideration the alteration of glandular glycogen and protein concentration, during various stages of oestrous cycle, variation in the viscosity of saliva has been suggested; in phase with the cyclicity.

Efeito do diazepam na secreçäo salivar e na atividade metabólica da glândula submandibular de ratos / Diazepan efects in salivary secretion and metabolic activity in rats salivary glands

Vários medicamentos podem modificar o fluxo salivar com efeitos indesejáveis à cavidade oral. Dentre essas drogas encontram-se os antidepressivos. Procurou-se nesse trabalho estudar o efeito da administraçäo crônica de diazepam (Vallium) nas propriedades das glândulas salivares de ratos. Foram utilizados 115 animais de 21 dias de idade, divididos em dois grupos, que receberam injeçäo diária de diazepam na dose de 0,28 mg/Kg (grupo experimental) e NaCl a 0,9% (grupo controle). Após 30 dias analisou-se a saliva dos animais, em termos de fluxo e concentraçäo protéica. Nas glândulas submandibulares determinou-se a concentraçäo de glicogênio, a atividade de glucose-6-fosfato desidrogenase e o quociente metabólico do tecido. Procurou-se também estudar o efeito da droga no crescimento dos animais. Os resultados mostraram que a única diferença significativa observada foi a diminuiçäo do fluxo salivar dos animais que receberam a droga estudada, sugerindo que o diazepam, mesmo utilizado cronicamente, näo afeta o metabolismo das glândulas salivares

Açäo da furosemida sobre o transporte de sódio pelo adenômero da glândula submandibular do cäo / The action of furosemide on the sodium transport by the adenomer of the dog submandibular

A furosemida é capaz de diminuir a secreçäo salivar e também a reabsorçäo ductal de sódio aparentemente por açäo direta sobre os mecanismos de transporte iôntico. A determinaçäo do principal local de açäo da droga no adenômero da glândula submandibular do cäo foi o escopo deste trabalho. Quarenta e sete cäes foram utilizados (22 como controle) e, após anestesia com Thionembutal intravenoso, tiveram dissecados o nervo corda do tímpano e o ducto excretor da glândula submandibular que era subsequentemente canulado. O grupo experimental teve os seus ureteres também dissecados e canulados para que se tornasse evidente a açäo diurética da droga. A partir da análise de 640 amostras de saliva foram calculadas as quantidades totais de sódio excretadas e os fluxos salivares por minuto. O sódio reabsorvido por minuto pelos ductos era obtido da diferença entre o excretado na saliva acinosa e na final, baseado no conhecimento de que näo existe transporte de água pelos ductos. Os resultados mostram que a furosemida provoca uma dimuniçäo acentuada do fluxo salivar e maior reabsorçäo do sódio pelos ductos, especialmente nos fluxos baixos o que permite supor que a droga teria agido principalmente sobre a ATPase Na-K das células acinosas

Alteraçöes bioquímicas, histológicas e histoquímicas da glândula submandibular em ratas submetidas a ressecçäo distal de 80% de jejunoíleo / Biochemical, histological and histochemical changes of the submandibular gland in rats subjected to distal resection of 80% of the ileojejunum

Este trabalho experimental trata dos efeitos da ressecçäo distal de 80% do jejunoíleo na glândula submandibular de ratas da raça Wistar. A partir de um grupo de animais ressecados (R) e de um grupo-controle (C) foram realizados estudos bioquímicos, histológicos e histoquímicos, com o sacrifício dos animais num período variável entre 75 e 100 dias. Observou-se que a concentraçäo de proteína total e a atividade da protease apresentaram-se significantemente reduzidas nos animais ressecados. Do mesmo modo, as reaçöes para glicoproteínas e para o aminoácido triptofano mostraram marcante diminuiçäo ao nível dos dutos granulosos da glândulas submandibulares dos animais ressecados. O estudo histológico constatou evidente reduçäo da concentraçäo dos grânulos de secreçäo ao nível das células dos dutos granulosos das glândulas submandibulares dos animais do grupo (R), quando foi utilizada a coloraçäo pelo tricrômico de Mallory

Administraçäo de Parotin em ratas prenhes e seu efeito sobre o peso ponderal dos filhotes / Parotin administration in pregnant rats and its effect on the ponderal weight of the youngs

O peso corporal de 48 filhotes nascidos de ratas injetadas com Parotin apresentou-se aumentado em relaçäo a 12 animais nascidos de ratas controle; sendo que aos 5 e 15 dias referido ganho de peso foi estatisticamente significativo. Igualmente os pesos absoluto e relativo da glândula submandibular apresentaram diferenças estatisticamente significativas aos 5 e 15 dias de vida